凱氏定氮儀對蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量的測定改進(jìn)
來源： http://m.hostingz.cn/ 類別：實(shí)用技術(shù) 更新時間：2014-03-24 閱讀次
蜂產(chǎn)品的營養(yǎng)價值十分豐富，是人們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｒ姷木G色保健品。蜂產(chǎn)品的蛋白質(zhì)含量是十分可觀的，其測定方法主要是采用凱氏定氮儀進(jìn)行測定的。但是這種方法操作起來十分繁瑣，消化的時間也比較長，需要蒸餾滴定，費(fèi)時費(fèi)力。但是通過改進(jìn)消化條件,即采用過氧化氫-濃硫酸混合液為消化液,消化過程中滴加硝酸-高氯酸混合酸,縮短了消化時間。樣品中的蛋白質(zhì)與硫酸和催化劑一同加熱分解,生成的氨與硫酸反應(yīng)生成硫酸銨,硫酸銨在堿性溶液中與次氯酸鹽生成一氯胺,在亞硝基鐵氰化鈉催化作用下與水楊酸生成藍(lán)色化合物,可在655nm波長下比色定量。
稱取樣品2.0g于250mL定氮瓶中,加入硫酸銅0.5g,硫酸鉀5.0g,硫酸-過氧化氫(2+1)混合液20mL;搖勻后于瓶口放一小漏斗,置于有石棉網(wǎng)的可調(diào)電爐上,小火加熱,至泡沫停止后,加大火力,緩慢分次滴加硝酸-高氯酸(4+1)混合酸2~3mL,樣液變藍(lán)透明后,繼續(xù)加熱30min,取下放冷后,加水20mL,冷卻后分次洗入500mL(蜂蜜消化液洗入250mL)容量瓶中。移取樣品消化液5.0mL于另一個100mL容量瓶中,加水至刻度備用,同時作試劑空白。
通過改進(jìn)凱氏定氮儀對蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)消化的條件,有效地縮短了反應(yīng)時間,由原來的3.5h縮至2h左右。由于水楊酸光度法樣品消化液不需要蒸餾,直接用于測定,更適宜于批量樣品的測定,水楊酸光度法與國標(biāo)法比較無顯著性差異,所以水楊酸光度法因其操作簡便、準(zhǔn)確、迅速,可用于蜂產(chǎn)品中蛋白質(zhì)的測定。凱氏定氮儀對蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量的檢測結(jié)果十分精準(zhǔn)，可以采用。
稱取樣品2.0g于250mL定氮瓶中,加入硫酸銅0.5g,硫酸鉀5.0g,硫酸-過氧化氫(2+1)混合液20mL;搖勻后于瓶口放一小漏斗,置于有石棉網(wǎng)的可調(diào)電爐上,小火加熱,至泡沫停止后,加大火力,緩慢分次滴加硝酸-高氯酸(4+1)混合酸2~3mL,樣液變藍(lán)透明后,繼續(xù)加熱30min,取下放冷后,加水20mL,冷卻后分次洗入500mL(蜂蜜消化液洗入250mL)容量瓶中。移取樣品消化液5.0mL于另一個100mL容量瓶中,加水至刻度備用,同時作試劑空白。
通過改進(jìn)凱氏定氮儀對蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)消化的條件,有效地縮短了反應(yīng)時間,由原來的3.5h縮至2h左右。由于水楊酸光度法樣品消化液不需要蒸餾,直接用于測定,更適宜于批量樣品的測定,水楊酸光度法與國標(biāo)法比較無顯著性差異,所以水楊酸光度法因其操作簡便、準(zhǔn)確、迅速,可用于蜂產(chǎn)品中蛋白質(zhì)的測定。凱氏定氮儀對蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量的檢測結(jié)果十分精準(zhǔn)，可以采用。
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